ASSESSMENT OF SILK FIBROIN FOR URETHRAL RECONSTRUCTION
Author
Sakota, Iva
Term
4. term
Publication year
2018
Submitted on
2018-05-31
Pages
53
Abstract
Baggrund: Forsnævring af urinrøret (uretrastriktur) har tendens til at vende tilbage efter behandling, så standardmetoderne rækker ofte ikke langt. Silkefibroin (SF), et biomateriale fra silke, har vist lovende resultater til reparation af sådanne skader, især når det kombineres med dyrkede celler. Det er dog endnu uklart, hvilke cellekombinationer der er bedst på et SF‑stillads. Formål: At afprøve en metode til at vurdere SF‑baserede, vævsengineerede ark til reparation af defekter i urinrøret. Metoder: Fire fremstillingsmetoder til stilladser blev testet: elektrospinding, fritstående silkefilm, frysetørring og trinvis aflejring af SF. Stilladserne blev efterfølgende podet med keratinocytter og fibroblaster. Tynde polyesterindsatser (med og uden SF‑belægning) fungerede som kontrol, hvor transepitelial elektrisk modstand (TEER) blev målt som et mål for barrieredannelse. Derudover blev immunofarvning brugt til at følge cellernes vækst. Resultater og konklusion: Alle metoder undtagen de fritstående silkefilm gav stilladser med passende tykkelse og mekaniske egenskaber, som understøttede cellevækst. SF understøttede generelt cellevækst, men en SF‑belægning på polyesterindsatser gav ikke tydelige forskelle i vækst sammenlignet med ubelagte indsæt. TEER‑målinger var uens over tid, muligvis fordi SF‑belægningen løsnet fra overfladen og på grund af udfordringer ved selve målemetoden. Desuden påvirkede samsåning med fibroblaster dannelsen af tight junctions (tætte cellekontakter) i keratinocytter kun, når cellerne var sået på SF‑belagte indsæt.
Background: Urethral strictures often recur after treatment, so current options are limited. Silk fibroin (SF), a silk-derived biomaterial, has shown promise for repair, especially when combined with seeded cells, but the best cell combinations on SF scaffolds are still unknown. Aim: To test a method for assessing SF-based tissue-engineered sheets intended to repair urethral defects. Methods: Four scaffold fabrication methods were evaluated: electrospinning, freestanding silk films, freeze-drying, and stepwise SF deposition. Scaffolds were seeded with keratinocytes and fibroblasts. Thin polyester inserts (with and without an SF coating) served as controls, and transepithelial electrical resistance (TEER) was measured as an indicator of barrier formation. Immunostaining was used to track cell growth. Results and conclusion: All methods except freestanding silk films produced scaffolds with suitable thickness and mechanical properties that supported cell growth. SF generally supported cell growth, but adding an SF coating to polyester inserts did not show a clear difference compared with uncoated inserts. TEER values varied over time, possibly due to detachment of the SF coating and challenges with the measurement procedure. Co-seeding with fibroblasts influenced tight junction formation in keratinocytes only on SF-coated inserts.
[This abstract was generated with the help of AI]
Documents